La PCR rápida RT-LAMP

El sistema RT-LAmp también llamado PCR rápida, es la última innovación en el diagnóstico molecular:

  1. Sin termociclador (ahorra cientos de miles de pesos)
  2. Con personal regular de laboratorio
  3. En menos de una hora
  • En Amunet hemos desarrollado la plataforma RT-LAMP para realizar reacciones moleculares de PCR. Esta tecnología funciona para detectar no solo el virus , sino también enferemedades oncoloógicas. Vea nuestras investigaciones para saber más
  • Ofrecemos también la Prueba Rápida de Antigeno Covid en saliva, que a diferencia del RT-LAMP se realiza en punto de uso 

Video del proceso de análisis PCR Rapida RT-LAMP

El ensayo RT-LAMP es relativametne sencillo de realizar. Observe la cantidad de equipo y operaciones para obtener el resultado 

Realizar un test PCR Rápido RT-LAMP es Super Sencillo

Invitación a Investigadores Médicos Biologos a desarrollar con nosotros

Estamos también desarrollando el sistema RT-LAMP-Crispr

Éste método de detección utiliza la combinación de 3 tecnologías LAMP, CRISPR y Cromatografía de flujo lateral para la detección de ácidos nucleicos.

Se logra a través de la  amplificación de la señal por CRISPR utilizando la nucleasas Cas12a o Cas13 con un ARN guía con capacidad de reconocimiento de la región amplificada del gen N por RT-LAMP, utilizando como reportero una sonda marcada con biotina. Si la enzima Cas12a reconoce la región amplificada por RT-LAMP inicia su actividad nucleasa y degrada el reportero.

Invitamos a centros de investigación a participar en proyectos Crispr Oncológicos

Monitoreo Epidemiológico con PCR rápida RT-LAMP en saliva

 

Para el sano regreso a clases es necesario contar con un  método económico y de alerta temprana para del COVID-19. El PCR es la tecnología que está de salida y llegando ahora las técnicas basadas en LAMP y CRISPR.

Esta prueba tiene como objetivo ser de carácter molecular, es decir detectar ADN o ARN de los virus de forma económica: Los reactivos son mas económicos y los costos de infraestructura son infinitamente menores pues no se requiere el termociclador de tiempo real: los sistemas LAMP-CRISPR revolucionaran el diagnóstico por ADN.

Ahora bien, la saliva como tal contiene menos cantidad de Virus por lo cuál no es ideal para el uso diagnóstico. La muestra ideal proviene de la zona nasofaríngea, lo cuál implica utilizar un hisopo que es molesto para muchos pacientes, y si pensamos en los niños es mucho más traumante.

Es por ello que para el regreso a clases hemos desarrollado la prueba para la detección en Saliva, aunque con menor sensibilidad que las muestras nasofaríngea, puede detectar la presencia del virus antes de que el paciente tenga síntomas de COVID-19[/vc_column_text]

Función del esquema del regreso a clases:

  1. Los niños escupen en un bote contenedor.
  2. Las muestras se llevan a laboratorio.
  3. Al día siguiente por la mañana se envía la notificación de los pacientes positivos.

El costo objetivo de la prueba es de 12 USD en comparación de los 100 USD de la prueba basada en PCR y muestra nasofaríngea.

¿Cómo Funciona?” 

El método de detección de RNA de SARS-CoV-2 basado en CRISPR–Cas12a, Este ensayo utiliza de manera simultanea una transcripción inversa y amplificación isotérmica mediante una amplificación mediada por bucle (RT-LAMP) utilizando como muestra RNA extraído de muestras nasofaríngeas, seguido de la detección de secuencias predefinidas correspondientes a SARS-CoV-2 utilizando un sistema basado en colorimetría

1. Extracción de ARN viral a partir de una muestra tipo saliva o nasofaríngea

Retro transcripción y amplificación del gen N de la Nucleoproteína de SARS-CoV-2 por amplificación isotérmica mediada por loops (RT-LAMP), se utiliza un set de primers específicos para el gen N y como muestra el ARN viral extraído

Amplificación de la señal por CRISPR utilizando la nucleasas Cas12a con un ARN guía con capacidad de reconocimiento de la región amplificada del gen N por RT-LAMP, utilizando como reportero una sonda marcada con biotina. Si la enzima Cas12a reconoce la región amplificada por RT-LAMP inicia su actividad nucleasa y degrada el reportero.

Revelado de resultados con una tira de flujo lateral que contiene un conjugado con estreptavidina y una sonda de captura complementaria al reportero impresa en línea de prueba. Si la sonda no es degradada por la enzima Cas12a se visualiza la línea de test y la línea control indicativo de un resultado NEGATIVO,  si la sonda se degrada por la Cas12a se visualiza son la línea de test indicando un resultado POSITIVO.